Как определить группу крови по стандартным сывороткам

Определение группы крови по стандартным сывороткам используется часто (по сравнению с другими методиками). В основе данной техники — содержащиеся в крови агглютинины и агглютиногены в различных комбинациях.

Методика определения группы крови по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам

  • под соответствующими обозначениями группы крови на тарелку наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I (бесцветная), II (голубая), III (розовая) групп крови (титр 1:32) в объеме 0,1 мл (одна большая капля около 1 см в диаметре);
  • наносят две серии сывороток каждой группы;
  • шесть капель исследуемой крови (величиной примерно с булавочную головку) по 0,01 мл;
  • последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину (тарелку) в шесть точек, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки (соотношение кровь: сыворотка равно 1:10);
  • осторожно перемешивают разными палочками (или уголками предметных стекол);
  • после перемешивания тарелку периодически покачивают;
  • агглютинация начинается в течение первых 10-30 сек., однако наблюдают до 5 минут ввиду возможности поздней агглютинации;
  • в те капли, где агглютинация произошла, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия (проверка на ложную агглютинацию).

Группа крови оценка совместимости

Для оценки совместимости групп крови и возможности трансфузий необходимо исследование реакции антител сыворотки донора и эритроцитов реципиента, а также эритроцитов донора и антител сыворотки реципиента.

При совместимости групп крови смешивание эритроцитов и сыворотки не приводит к изменению состава и окраски реакционной капли.

При несовместимости групп смешивание эритроцитов донора и сыворотки пациента вызывает реакцию агглютинации – образование в капле неоднородностей в виде слипшихся эритроцитов, точечно насыщающих поле реакции.

Резус-фактором (Rh) называют антиген D, который может располагаться на поверхности эритроцитов. Наличие или отсутствие этого антигена на поверхности эритроцитов индивидуума определяет такую характеристику группы крови, как резус положительная или резус отрицательная (Rh+ или Rh–). Примерно 85% популяции людей имеют резус-положительную группу крови (Rh+).

В отличие от антител к антигенам АВ, антитела к антигену D не присутствуют в крови. При контакте крови резус-положительной группы с резус-отрицательной, происходит сенсибилизация и синтез анти-резусных антител. Такая реакция развивается, например, при беременности Rh– матери Rh+ плодом. Выход фетальных клеток во время родов в кровоток матери активизирует синтез антирезусных антител. В случае пересечения антирезусными антителами плацентарного барьера и попадания в кровь плода, развивается гемолитическая желтуха новорожденного, обусловленная разрушением эритроцитов.

Определение резус фактора необходимо для каждого индивидуума в дополнение к определению группы крови. Отмечено, что выраженность структуры эритроцитарного антигена различна у здоровых людей и тем более у иммуноскомпроментированных больных, беременных женщин.

В настоящее время определение групп крови, резус фактора, продукции антиэритроцитарных антител выполняется в автоматическом режиме стандартизированными методами, позволяющими одномоментно проводить как типирование групп крови, определение продукции антител, так и совместимости возможных трансфузий. Визуальное отображение полученной карты для каждого пациента может быть востребовано в течение всей жизни пациента, она хранится в базе данных лаборатории.

Читайте также:  Волосатоклеточный лейкоз

Показания к исследованию: Любое стационарное лечение, беременность.

Условия взятия и хранения образца

Для исследования используется венозную кровь, взятую с ЭДТА или без консервантов. Взятие крови производится натощак, или не менее чем через 8 ч после последнего приема пищи. Образец крови может храниться при температуре от 4–8 °С не более 24 ч.

Результаты исследования

Группа крови системы АВО:

  • 0 (I) – первая группа;
  • A (II) – вторая группа;
  • B (III) – третья группа;
  • AB (IV) – четвертая группа крови.

При выявлении подтипов (слабых вариантов) групповых антигенов результат выдается с соответствующим комментарием, например, «выявлен ослабленный вариант А2, необходим индивидуальный подбор компонентов крови».

Резус принадлежность

  • Rh (+) положительная;
  • Rh (–) отрицательная.

При выявлении слабых и вариантных подтипов антигена D выдается комментарий: «выявлен слабый резус-антиген, рекомендуется при необходимости выполнять трансфузию резус-отрицательных компонентов крови».

Методика определения показателей

Определение групп крови по стандартным сывороткам проводится с использованием реактивов, содержащих агглютинины разных групп, вступающих в реакцию с агглютиногенами, находящимися на поверхности эритроцитов.

Чтобы выявить группу крови, достаточно воспользоваться стандартными сыворотками лишь II и III групп. Однако для исключения возможных ошибок с целью дополнительного контроля используют и остальные (I и IV групп).

Изготовление сыворотки

Стандартные сыворотки для определения группы крови получают из донорской крови. С этой целью используют специальную систему: выделяют плазму вместе с находящимися в ней антителами, затем ее разводят изотоническим раствором хлорида натрия.

Помещают 1 мл раствора NaCl 0,9% в пробирку, добавляют плазму (1 мл), взбалтывают состав. Берут 1 мл полученной смеси, переносят в другую пробирку с изотоническим раствором.

Манипуляцию повторяют, пока не получат разведение смеси в пропорции 1:256. Другие разведения не используют, чтобы исключить возникновение ошибки.

Методика определения показателей

Для одного исследования группы крови с помощью стандартных сывороток их требуется 3 (2 серий для каждой группы), отличающихся по цвету:

  • I (0) — прозрачная жидкость, флакон снабжен белой этикеткой;
  • II (А) — жидкость голубая, флакон с 2 полосами синего цвета;
  • III (В) — бледно-розовая жидкость, флакон с 3 розовыми полосками;
  • IV(АВ) — желтая жидкость, на этикетке флакона 4 желтые полоски.

На этикетках указаны:

  • титр;
  • срок годности;
  • дата выпуска;
  • серийный номер.
  • данные об изготовителе.

Проведение исследования

Температура в помещении должна быть в пределах +15…+ 25°С, требуется хорошее освещение.

Используют специальный планшет, имеющий области с пометками. На него наносят каждую сыворотку (берут 2 образца, 1 из них — контрольный, 2 — для диагностики).

Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают каплю крови, смешивая с каждым в отдельности реагирующим раствором. Спустя несколько минут (5-6) анализируют полученные данные:

  • если происходит реакция агглютинации — сывороточный тест считается положительным;
  • при отсутствии агглютинации тест отрицательный.

Результаты исследования

В случае положительного результата эритроциты склеиваются (в реагирующем растворе образуются красные сгустки).

Методика определения показателей

Если цвет раствора не изменился, реакция считается отрицательной. Есть закономерности, зависящие от комбинаций отрицательных и положительных реакций, происходящих в растворах:

  • I(0), если ни в одном образце нет положительной реакции;
  • II (А), если в образце II (А) состояние не изменилось, а в 2 остальных оказалась положительная реакция;
  • III(В), если только в образце III(В) реакция оказалась отрицательной;
  • IV(АВ), если в каждом из 3 образцов реакция оказалась положительной.

Появление других комбинаций связано с погрешностями, возникающими при исследовании.

Использование старых реактивов или неправильное проведение анализа может сопровождаться слабой реакцией. В таких случаях с целью уточнения необходимо сделать тесты с использованием других методик.

Читайте также:  Как быстро повысить гемоглобин в домашних условиях

ВконтактеFacebookTwitterGoogle+Одноклассники

Определение группы крови цоликлонами: алгоритм действий, резус-фактора, как с помощью, таблица

Определение группы крови цоликлонами делают беременным женщинам перед родами, больным людям — до проведения хирургической операции, и когда может понадобиться переливание крови. Есть и другие способы с применением различных веществ, но этот метод самый точный и применяется чаще всего.

Что такое цоликлон

Цоликлоны для определения группы крови представляют собой антитела, получаемые по специальной технологии. Чтобы получить цоликлоны, используют лабораторных подопытных крыс. Грызунам делают инъекцию специального средства, а затем берут кровь из брюшины, она включает вещества, которые нужны для анализа.

Цоликлоны по своему составу относятся к иммуноглобулинам, они реагируют с антигенами, находящимися на оболочке эритроцитов. Типы этих веществ используются для выявления группы. Во время анализа цоликлоны разных видов вступают в реакцию с агглютиногенами, это дает возможность выявить группу и резус-фактор человека.

Препарат производят в жидком виде в бутылках по 5 и 10 мл. Каждый вид препарата обладает своими характеристиками.

Цоликлоны отличаются преимуществом перед другими сыворотками, т.к. не требуют долгой подготовки к обследованию и дают возможность сделать его быстро. Они не представляют собой человеческие клетки, ввиду чего при контакте с ними медики не смогут заразиться какой-либо инфекцией.

Подготовка к процедуре

Определение группы крови цоликлонами: алгоритм действий, резус-фактора, как с помощью, таблица

В кабинете должна отсутствовать пыль, мухи, насекомые, которые могут помешать выполнению теста. Помещение должно быть хорошо освещено.

Флакон с цоликлонами должен быть плотно закрыт, чтобы реагенты не пересохли, в противном случае достоверность анализа снизится. Для определения группы крови и резуса при помощи цоликлонов нужна специальная подготовка.

В лабораторном кабинете температура воздуха может быть +15…+25ºC, в этом случае результат будет точным.

Перед анализом подготавливают нужные медицинские инструменты:

  • пробирку;
  • планшет, на который наносят реагент;
  • пипетки;
  • палочки для изъятия лабораторных образцов.

Если медицинский работник не только выполняет исследования, но и берет анализ у пациента, то надо подготовить:

  • жгут;
  • спирт для медицинской обработки;
  • одноразовый шприц;
  • пробирки;
  • ватный тампон;
  • салфетки;
  • специальный лабораторный маркер.

Как проводится исследование

Алгоритм определения группы крови цоликлонами состоит в следующем. Лабораторное тестирование осуществляется при помощи 3 видов этих веществ:

  • «Анти-A» красного цвета, такой же оттенок имеет бутыль, крышка и этикетка препарата.
  • «Анти-B» имеет синий цвет, а также крышку, бутыль и этикетку, окрашенные в синий тон.
  • «Анти-D» — бесцветный и находится в прозрачной бутылке.

При определении резус-фактора цоликлонами нельзя применять некачественные реагенты. Если флакон имеет дефекты или внутри жидкости есть осадок, то реагент потеряет свое действие.

Чтобы определить группу, медицинский работник наносит цоликлоны на лабораторную пластину, выполненную в виде таблицы. Наносятся реагенты разных типов (A, B и D). Каждый образец подписывается.

Цоликлон наносят на отмеченный участок. Каждый вид реагента берут своей пипеткой.

Рядом с сывороткой капают по 1 капле крови человека, затем чистой палочкой ее размешивают с реагентами. Через несколько секунд начнется реакция. Лаборант проводит наблюдение за реагентами 3 минуты. Потом можно расшифровывать результат анализа.

Определение группы крови цоликлонами: алгоритм действий, резус-фактора, как с помощью, таблица

Расшифровка результатов

Определение типа крови с помощью цоликлонов происходит при расшифровке результатов анализов. Если в образце нет реакции склеивания, значит, в анализе нет агглютиногена данного типа. В этом случае анализ относится к 1 группе. Если клетки вступают в реакцию с реагентами «Анти-A» и «Анти-D», значит, у человека 2 тип (A).

Читайте также:  Лейкозы у детей: симптомы, диагностика, лечение

Взаимодействие эритроцитов с цоликлонами типа «Анти-B» и «Анти-D» показывает, что у человека 3 группа (тип B). Если тельца вступили во взаимодействие со всеми видами цоликлонов, то у больного 4 группа крови (тип D).

При выявлении группы крови при помощи этих реагентов не придется проводить дополнительную проверку, т.к. цоликлоны не имеют каких-либо добавок, вызывающих неправильную реакцию.

Группа крови определяется в медицинском учреждении, анализ осуществляется в специальной лаборатории.

Таблица расшифровки результатов исследования:

Этот тест позволяет узнать жизненно необходимые данные о группе и резус-факторе пациента. Результаты позволяют оказать медицинскую помощь и перелить кровь больному после операции. Чтобы узнать свою группу, можно провести анализ в лаборатории любого медицинского учреждения. Информацию заносят в анкету пациента и хранят полученные данные в поликлинике в течение нескольких лет.

Редкость результатов

Из четырех типов плазмы самой редкой считается четвертая отрицательная, а самые распространенные первая и вторая. Если вы получите результат редкого типа, не расстраивайтесь, ведь такие люди имеют свои особенности. Каждый думает, что это именно меня коснулась такая редкость, но это не так. На планете около 15% населения с редкими плазмами и это не мешает им счастливо жить.

Можно сказать, что люди с распространенными группами страдают намного больше, что касается питания и различных заболеваний. В данном случае главное, что бы медики смогли правильно рассчитать показатели и чтоб не получился ложный вывод. Особенно это важно при переливаниях, ведь любая несовместимость может дать свои последствия.

Если вы подумали, что вас обманули в одном центре, то можете сделать контрольную проверку в другой лаборатории. Если вы до сих пор не сделали такой анализ, но в то же время сидите и думаете: «Действительно для меня это очень важно!» нужно скорей заняться этим вопросом и чем быстрее, тем лучше.

Переливание цельной крови и ее компонентов

В начале XX века, на заре транфузиологии, переливали только цельную кровь. Но примерно в конце 1940-х годов врачи догадались, что кровь можно разделять на компоненты. Это была революция в трансфузиологии: стало понятно, что не нужно наращивать до бесконечности количество доноров. Далеко не каждый пациент нуждается в переливании цельной крови: одним не хватает только эритроцитов, другим — тромбоцитов, третьим — белков плазмы.

В России цельная кровь не используется, потому что пока не существует нормативов, которые регулируют ее заготовку, хранение и перевозку.

Что такое резус-фактор

Резусная принадлежность связана с наличием или отсутствием антигена D. На самом деле существует 5 главных и несколько дополнительных резус-факторов, но этот обладает самым мощным влиянием на выработку антител – обладает высокой иммуногенностью. Резусный антиген никак не связан с группой крови, на него не могут повлиять внешние факторы или заболевания, он всегда остается неизменным с рождения.

Что такое резус-фактор

Образование группы белков на внешней оболочке эритроцитов, которые определяют резус-фактор, начинается на ранних сроках формирования плода. У новорожденного они присутствуют уже в достаточном количестве для определения. Анализ крови на резус-фактор момент назначаться при переливаниях компонентов или цельной крови, он важен при планировании беременности и при ведении пациенток, у которых вероятен резусный конфликт крови матери и плода.